在生物医疗实验中,电泳缓冲液的正确配制至关重要。以下是两种常用缓冲液的配方。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
要配制1L的50×TAE缓冲液,请按照以下成分及用量配制:
- 2 mol/L Tris碱: 242 g
- 1 mol/L 乙酸: 571 ml 冰乙酸(174 mol/L)
- 100 mmol/L EDTA: 200 ml 的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 去离子水: 补足至1L
2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
要配制1L的5×TBE缓冲液,请按照以下成分及用量配制:
- 445 mmol/L Tris碱: 54 g
- 445 mmol/L 硼酸盐: 275 g 硼酸
- 10 mmol/L EDTA: 20 ml 的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 去离子水: 补足至1L
3. 染料配置
在生物医疗实验中常用到几种染料,具体配制如下:
1%溴酚蓝
将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100 ml水中,搅拌至完全溶解。
1%二甲/苯青FF
将1 g二甲/苯青FF溶解于足量水中,定容至100 ml。
10 mg/ml溴化乙锭
小心称取1 g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。使用铝箔包裹容器,存放于4℃条件下。
4. 凝胶上样液
根据不同实验需求,凝胶上样液的配制如下:
6×碱性凝胶上样液
将各成分按以下用量配制10 ml溶液:
- 0.3 N氢氧化钠: 6 mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型)
- 0.15%溴甲酚绿
- 0.25%二甲/苯青FF
- 水: 300 μl
- 10 N氢氧化钠: 120 μl
- 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0): 18 g,补足至10 ml
6×聚蔗糖凝胶上样液
配制成分为:
- 0.15%溴酚蓝
- 0.15%二甲/苯青FF
- 5 mmol/L EDTA
- 15%聚蔗糖(400型)
- 水: 15 ml
- 1%溴酚蓝: 15 ml
- 1%二甲/苯青FF: 100 μl
- 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0): 15 g,补足至10 ml
使用鸿运国际品牌高品质材料,确保实验结果的准确性和可重复性。无论在基础研究还是在临床应用中,正确配制缓冲液和上样液,将直接影响实验的成功与否。