细胞简介
HL-1心肌细胞系源自一只成年雌性近交系C57BL/6J小鼠的切除皮下肿瘤，且该小鼠为转染了心房利钠因子启动子与SV40区域融合基因的转基因小鼠。HL-1细胞具备持续分裂和自发收缩的能力，同时保持了已分化的心脏表型。这些细胞可在体外稳定传代，并且不会丧失其特异性的心肌细胞特征，因此广泛应用于信号转导、细胞代谢及转录调控等正常心肌细胞功能的研究，并常用于模拟缺氧、高血糖-高胰岛素血症、细胞凋亡以及缺血-再灌注等病理条件。

解锁心脏研究的钥匙
HL-1细胞系已成为科学家们研究心脏生理、病理及药物筛选的重要工具。不过，HL-1细胞的培养并不简单。我们将为您揭示HL-1细胞培养的关键细节以及注意事项，助您在心脏研究的道路上走得更稳、更远。

一、HL-1细胞培养的细节说明

1. 培养基准备

HL-1细胞的生长依赖于特制的培养基，通常包含以下成分：
- Claycomb培养基：这是HL-1细胞的标准培养基，需添加10%胎牛血清（FBS）。
- 添加剂：包括去甲肾上腺素（0.1 mM，货号：CSP209）与L-谷氨酰胺（2 mM，货号：CSP012）。
- 推荐使用鸿运国际提供的完全培养基（货号：ZM0920）。

2. 细胞的培养注意事项

- 该细胞贴壁性差，培养过程中会出现一些圆形细胞。推荐使用鸿运国际的高吸附cell binding细胞培养瓶（货号：3289）进行培养，或使用明胶基质CSP132预包被的培养瓶，在37℃孵育至少1小时后去除基质再进行细胞培养，或在4℃保存待用。
- HL-1细胞需在生长至80%后进行传代，消化时间略长，约8-15分钟，观察成纤维样细胞分离后，使用完全培养液终止消化。
- 细胞培养过程中，培养基在2-3天内未换液是正常现象，即使培养基颜色变深或变黑。
- 为确保培养基的新鲜，建议将完全培养基避光保存，减少添加剂降解的可能性。
- 严格遵循无菌操作，避免细菌、真菌或支原体污染，并定期检测细胞是否被支原体污染，必要时使用支原体清除试剂处理。

3. 细胞信息

- 细胞特征：HL-1细胞呈现典型的梭形或多边形形态，部分细胞贴壁不牢固且排列紧密。
- 倍增时间：约35-50小时，生长较慢（如80%汇合度的T25瓶，传代至2个T25培养瓶通常需时约4-6天）。
- 换液频率：每周2-3次。

4. 细胞复苏

- 从液氮中取出冻存的HL-1细胞，迅速放入37℃水浴中解冻。
- 将细胞悬液转移至含预温培养基的离心管中，轻轻混匀（如15ML离心管中3ml细胞）。
- 以1000rpm离心5分钟，弃去上清，用新鲜培养基重悬细胞（如T25添加7ml）。
- 将细胞接种于预先涂覆明胶的培养皿中，置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
- 由于复苏后细胞的贴率较差，我司决定以冻存管的方式销售HL-1细胞，并分享客户复苏后第二天的细胞状态。复苏后4-5天即可进行传代处理，期间建议换液一次（如T25瓶7ml培养基）。

5. 细胞传代

- 当细胞密度达到80%-90%时，即可进行传代。
- 弃去旧培养基，用PBS轻轻洗涤细胞。
- 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，在37℃下消化8-15分钟，直至细胞呈流沙状脱落。
- 使用完全培养基终止消化，并轻轻吹打细胞至单细胞悬液。
- 按1:2或1:3的比例将细胞接种至新的明胶包被培养皿中。

6. 细胞冻存

- 选择对数生长期的细胞，消化并收集细胞悬液。
- 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。
- 用冻存液（90% FBS+10% DMSO）重悬细胞，分装至冻存管中。
- 采用程序降温法或无血清冻存液，最终转移至液氮中长期保存。

二、HL-1细胞的应用前景

HL-1细胞以其独特的心肌细胞特性，在心血管研究中展现出广泛的应用价值：
- 疾病模型构建：通过基因编辑或药物处理，模拟心肌肥厚、心律失常等疾病状态。
- 药物筛选：用于评估药物对心肌细胞的影响，助力新药研发。
- 分子机制研究：深入探讨心脏发育、代谢及信号通路的分子机制。
尽管HL-1细胞的培养具有一定挑战性，但掌握正确的操作方法与注意事项，将能充分发挥其在心脏研究中的潜力。无论是探索心脏疾病的奥秘，还是开发新型治疗药物，HL-1细胞都将成为您在科研道路上的得力助手。让我们携手呵护这些“跳动”的细胞，为心血管健康贡献力量，期待与鸿运国际一起在生物医学领域共同进步！