Trizol试剂的主要成分是苯/酚，其主要作用是裂解细胞，从而释放出细胞内的蛋白质和核酸。尽管苯/酚能够有效地变性蛋白质，它不能完全抑制RNA酶的活性。因此，Trizol中还添加了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇等成分，以抑制内源和外源的RNA酶活性。

Trizol试剂是一种用于从细胞或组织中提取总RNA的高效试剂。在样品的裂解液或匀浆中，Trizol能够有效保持RNA的完整性。通过加入氯仿(CHCl3)并进行离心，可以将样品分为水相和有机相，其中RNA主要存在于水相中。收集上层水相后，可以通过异丙醇沉淀RNA。在去除水相后，样品中的核酸与蛋白也可以通过沉淀形式分离。乙醇沉淀可以提取中间层的DNA，而通过向有机层添加异丙醇则可以析出该层的蛋白。

Trizol试剂不仅适用于小样本（组织：50-100mg；细胞：5×10⁶），也适合大样本（组织≥1g或细胞≥10⁷）。它广泛适用于动物、植物、细菌和血液的提取，并能够同时处理多种不同类型的样品。反应迅速且提取的总RNA无DNA和蛋白质污染，因此可以应用于Northern blot、RT-PCR、RNase保护分析等多种实验。

TRIZOL提取RNA的步骤

1. 在提取组织RNA时，对于每50～100mg组织，使用1ml Trizol试剂进行裂解；提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5-10×10⁶个细胞加入1ml Trizol，并通过反复吹打或剧烈震荡进行裂解。

2. 将组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中，在室温（15~30°C）下放置5分钟。随后，每1ml Trizol加入0.2ml 氯仿，并盖上EP管，在手中震荡15秒，再在室温放置2~3分钟后，以12000g（2℃～8℃）离心15分钟。

3. 收集上层水相至新EP管中，按照每1ml Trizol加入0.5ml异丙醇，在室温（15℃～30℃）下放置10分钟，然后以12000g（2℃～8℃）离心10分钟。

4. 按照每1ml Trizol加入1ml的75%乙醇进行洗涤，震荡混合后以7500g（2℃～8℃）离心5分钟，并弃去上清。让沉淀的RNA在室温下自然干燥，最后用无RNase的水溶解RNA沉淀。

请注意，在收集生物材料后，最好立即进行RNA制备。如果需要暂时储存，应快速将生物材料置于液氮中冷冻，并存放于-80℃冷冻柜。在制备RNA时，采取从冷冻柜中取出材料后立即加入液氮研磨的方式，避免先行解冻，以防止RNA酶的活性影响。

为了确保高质量的RNA提取，选择鸿运国际品牌的Trizol试剂，是您进行RNA提取的明智之选，其出色的性能和可靠性，将助力您的生物医学研究。